四種常見貧血患者紅細胞壽命的研究
華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院 鄧理南 李偉 汪智瓊 吳佳穎 羅文芳 孫漢英 孟凡凱*，武漢 430030
摘要 目的：研究自身免疫性溶血性貧血（AIHA）患者的紅細胞壽命，并與常見貧血患者的紅細胞壽命比較。方法：回顧性分析AIHA、骨髓增生異常綜合征（MDS）、重型再生障礙性貧血（SAA）和缺鐵性貧血（IDA)4組共55例患者的臨床資料，以同期12例健康志愿者為正常對照組。采用一氧化碳（CO）呼氣法測定紅細胞壽命，比較4種貧血患者和健康志愿者紅細胞壽命并作分析。結果：AIHA患者紅細胞壽命為（30.41±31.12)d,比MDS(53.44±32.61)d、SAA(54.53±22.56)d和IDA(58.75±31.29)d患者的紅細胞壽命均縮短（P<0.05),4組患者紅細胞壽命均較12例健康志愿者紅細胞壽命（118.16±25.88)d顯著縮短（P<0.01）。結論：紅細胞壽命縮短參與了AIHA、MDS、SAA和IDA患者貧血的發生，但在不同貧血疾病中所起作用程度不盡相同。
關鍵詞 紅細胞壽命；自免疫性溶血性貧血；骨髓增生異常綜合征；重型再生障礙性貧血；缺鐵性貧血
中圖分類號 R556 文獻標識碼 A DOI 10.11768/nkjwzzzz20190206
Life span of red blood cells in patients with four common types of anemia DENG Li-nan,LI Wei, WANG Zhi-qiong , WU Jia-ying , LUO Wen-fang, SUN Han-ying, MENG Fan-kαi* . Tongji Hospital Affiliated to Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030 , China
Abstract Objective : To investigate the life span of red blood cells ( RBC) in patients with autoimmune hemolytic anemia ( AIHA) , and compare with those of common anemia diseases. Methods: Clinical data of 55 patients in 4 groups with AIHA, myelodysplastic syndrome (MDS) , severe aplastic anemia ( SAA) and iron deficiency anemia (IDA) were retrospecttively analyzed, and 12 healthy volunteers in the same period served as normal controls. The endogenous Breath Carbon Mon oxide (CO) test was used to detect the life span of RBC, and the erythrocyte life span of patients in 4 different groups and healthy volunteers was observed and analyzed. Results: The erythrocyte life span of RBC in patients with MDS, SAA and IDA was (53. 44 ± 32. 61) , (54. 53± 22. 56) and (58. 75± 31. 29) days, respectively, which was significantly longer than that in the patients with AIHA [30. 41 ± 31. 12) days] ( P < 0. 05) . The life span of RBC in the 4 groups was significantly shorter than that of the 12 normal volunteers [118. 18± 25. 88) days] ( P < 0. 01) . Conclusion: The shortening of RBC life span is involved in the occurrence of anemia in patients with AIHA, MDS, SAA and IDA, but the role of erythrocyte life span varies with different diseases.
Key words Erythrocyte life span ; Autoimmune hemolytic anemia; Myelodysplastic syndrome; Severe aplastic anemia: Iron deficiency anemia
紅細胞壽命指的是紅細胞從骨髓釋放到外周血液后至其被機體清除所經歷的時間，健康個體的紅細胞壽命正常范圍為70～140 d，平均壽命為115 d[1]紅細胞壽命與機體造血的速度共同決定健康個體及不同疾病狀態下血紅蛋白的濃度，因此準確的測量紅細胞壽命對于理解臨床不同疾病貧血的發生機制具有重要價值。自身免疫性溶血性貧血（autoimmune hemolyticanem,AIHA）存在紅細胞壽命縮短[2]，但其他類型貧血是否存在紅細胞壽命縮短，鮮有文獻報道。近年利用血紅蛋白代謝產生一氧化碳（CO）來測量紅細胞壽命的方法具有簡便、快速、無創的特點，可較好滿足臨床需求。本立即采用該方法測量AIHA、骨髓增生異常綜合征（melodysplastic syndrome, MDS）、重型再生障礙性貧血（severe aplastic anemia,SAA）和缺鐵性貧血（iron deficiency anemia,IDA）患者的紅細胞壽命，分析不同疾病狀態下紅細胞壽命在貧血的發生中所起的作用。
資料與方法
一般資料 收集2017年6月～2018年3月就診于華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院血液科的AIHA、MDS、SAA和IDA 4組共55例患者的臨床資料，診斷標準參照相關文獻執行[3-6] ，以同期12例健康志愿者為正常對照組，其中男7例，女5例，中位年齡41(25～50）歲。健康個體無不適和相關檢查異常。以上受試者既往均無心、肺疾病，3周內未接受過輸血、獻血治療。
方法 采用紅細胞壽命測定儀RBCS-01（中國深圳先亞生物科技有限公司）測定紅細胞壽命。收集氣體前，受試者需空腹、禁煙并處于靜息狀態。收集時受試者呼氣前需深吸氣，屏住呼吸10s后將氣體呼入氣體收集裝置（棄去收集的前300mL氣體，該步驟可重復進行直至收集到1000mL氣體），同時收集同環境氣體作為本底氣。上機檢測CO濃度，計算出細胞壽命。
統計學處理 采用SPSS19.0統計學軟件，計量資料以（±s）表示，2組間數據分析采用兩獨立樣本t檢驗，采用方差分析進行多組間比較。以P<0.05為差異有統計學意義。結果
一般臨床特征 55例貧血患者中，男23例，女32例，中位年齡43(7～72）歲，其中AIHA患者12例，MDS患者16例，SAA患者15例，IDA患者12例，4組患者一般臨床特征比較，見表1。
紅細胞壽命 12 例健康志愿者紅細胞壽命為(118. 16 ± 25. 88) d，與文獻報道利用 51Cr[7]所測 13例健康人紅細胞壽命（110. 58 ± 20. 57）比較差異無統 計學意義（P > 0. 05）。55 例貧血患者紅細胞壽命為 (49. 87 ± 30. 59) d, AIHA 患者紅細胞壽命較 MDS、SAA,IDA 3 組患者均縮短 （P < 0. 05）。4 組貧血患者紅細胞壽命與 12 例健康人紅細胞壽命比較，差異顯著（P < 0. 01），見表 2，圖 1。
討 論
紅細胞生成減少或破壞增多是貧血發生的機制，前者臨床中常見的代表性疾病有再生障礙性貧血、IDA，后者常見的是 AIHA 。紅細胞壽命是反映 紅細胞破壞最為直接的一項指標 ，它對于理解不同 疾病貧血的病理生理機制有重要價值 。關于紅細胞壽命的研究有將近一個世紀的歷史，測量紅細胞壽命最旱有Ashby等[8]利用差異；疑集法測紅細胞壽命，此后，隨著同位素技術的興起，Bently[7]、Mock[8]、Khera等[10]分別用同位素標記紅細胞來直接測算紅細胞壽命，同時也有依據血紅蛋白代謝產物的co呼氣法測算紅細胞壽命以及基于網織紅細胞絕對值等直接測算紅細胞壽命的方法[11]。這些隨后發展出來的方法所測結果與Ashby[8]所得相近。除co呼氣法外，其他方法存在測量周期長、操作繁瑣以及具有放射危害等固有內在局限，因此這些方法難以廣泛用于測量臨床上常見貧血疾病的紅細胞壽命，同時也使得評估紅細胞壽命在不同疾病貧血的發生過程中的作用顯得十分困難。co呼氣法測量紅細胞壽命的方法克服了傳統方法的局限，具有簡便、快速、無創的特點，可準確測定紅細胞壽命滿足臨床需要。本立即采用此種方法測量AIHA、MDS,SAA和IDA患者的紅細胞壽命，同時以健康人紅細胞壽命作對照分析紅細胞壽命在不同疾病貧血的發生中的作用。該方法主要基于1分子血紅蛋白（α-亞基碳）代謝時會生成1分子co，而內源性co中大部分來源于血紅蛋白的降解（86%以上）和其他途徑（14%以下），在血紅蛋白降解產生的co中，大約85%來源于紅細胞降解，最終人體呼出的內源性co中有70%來源于紅細胞降解[11]。此外人體呼出氣中co由內源性co與外源性co組成，因此在排除呼出氣體中外源性co的前提下，可通過測量出呼出氣體中的內源性co濃度井代入公式：紅細胞壽命（d)=[HB]x1380I內源性co濃度[12](Levitt’s formula），便可推算紅細胞的壽命。文獻報道顯示51Cr標記[7]、15N甘氨酸[10]和生物素目標記等傳統方法所得健康人平均紅細胞壽命波動于110～122 d之間，本研究采用co呼氣法所測12例健康人紅細胞壽命結果與傳統方法相似。本研究首次采用該方法比較不同貧血疾病紅細胞壽命，結果顯示AIHA、MDS、SAA和IDA患者的紅細胞壽命較正常健康人均顯著縮短，提示紅細胞壽命除了參與溶血性貧血發生外，也參與了非溶血性貧血的發生。且AIHA患者紅細胞壽命較其他3組非溶血性貧血組患者紅細胞壽命也縮短，說明紅細胞壽命在溶血性貧血組和非溶血性貧血組所起致貧血的作用程度不同，造成這種差別的原因可能與不同疾病導致貧血機制不同相關。AIHA是由于免疫功能紊亂，機體產生針對紅細胞膜抗原的抗體、補體，使得紅細胞被破壞而壽命縮短，其中大部分紅細胞在脾臟被巨噬細胞破壞[3] 。MDS是一組起源于造血干細胞，以病態造血及高鳳險向急性白血病轉化為特征的疾病，有文獻發現MDS患者的紅細胞膜表面的膜磷脂絲氨酸（phosphatidylserine,PS）暴露和血型糖蛋白（glycophorin）丟失，PS正常情況下存在于細胞膜內部，當PS暴露于細胞膜表面后可被巨噬細胞受體識別并吞噬，而血型糖蛋白可通過與PS結合使得紅細胞免遭巨噬細胞吞噬，正是由于PS暴露和血型糖蛋白的丟失使得紅細胞易于遭受巨噬細胞吞噬而壽命縮短[13]。動物實驗發現敲除IEX-l基因的模型小鼠同樣也會縮短紅細胞壽命，該基因的缺失會使紅細胞表達CD47減少，CD47可與巨噬細胞表達的信號調節蛋白(signal regulatory protein,SIRP）結合，并且擇放抑制性信號，從而阻止紅細胞被巨噬細胞吞噬[14]。同樣導致再生障礙性貧血和IDA患者紅細胞壽命縮短的機制也不清。研究顯示，再生障礙性貧血紅細胞壽命縮短可能與紅細胞膜蛋白的含量、分布改變繼而使紅細胞膜的穩定性、形態和變形性改變有直接關系，正常情況下這些膜蛋白多以同型二聚體或同型多聚體的形式按特定順序排列，電鏡觀察發現再生障礙性貧血患者紅細胞膜中這些蛋白數量減少、排列順序改變。膜蛋白的這些改變使得經膜蛋白介導的能量代謝和離子通透等功能失常，導致紅細胞內ATP含量低下，繼而使紅細胞膜的穩定性、形態和可塑變形改變，最終壽命縮短閱。IDA患者紅細胞壽命縮短與缺鐵導致紅細胞中谷眈甘膚酶活性降低關系密切，這種酶活性的降低會使得紅細胞易遭受氧化損傷[i(j，另一方面缺鐵會使活性氫增多而使得紅細胞膜所遭受的氧化損傷的機會增多時，兩個因素疊加一起共同造成紅細胞壽命縮短。j窯血性貧血組與非溶血性貧血組紅細胞壽命的差異及其各自可能多樣的導致貧血的機制說明非溶血性貧血組的紅細胞壽命可能與紅細胞本身內在因素而非外在因素相關，對于非溶血性疾病紅細胞壽命的影響因素仍需進一步探究。
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神經細胞的氫化損傷[11,12]。腦醒靜方中梔子有減輕腦組織損傷的作用；冰片改善血腦屏障通透性；麝香有抗氧化和抗炎效果；郁金可生肌止血，促進腦組織恢復[13]，另外腦醒靜還可以抑制腦組織的細胞自噬作用。綜合以上藥物效果，有利于患者神經功能的改善和恢復[14]，使血腫周圍炎癥反應得到明顯降低，血清NO、IGF-l和MIF水平逐步恢復正常范圍。
提高患者遠期預后，特別是生活能力和生活質量的提高是HICH的重要治療目標。本研究中，實驗組患者的生活能力、生活質量和預后良好率均顯著高于對照組。實驗組患者更好的遠期預后得益于在依達拉奉抗氧化和減輕炎癥反應的基礎上，聯合醒腦靜改善腦部微循環、加速血腫眼收和抑制腦組織自瞌的作用，以及中醫“疏通經絡，醒腦開竅”功效，有效促進了患者旱期預后恢復，降低了遺留神經功能缺損的風險，為患者康復治療打下了良好基礎。
綜上所述，在高血壓腦出血患者的治療中應用醒腦靜聯合依達拉奉能夠促進血腫吸收，改善神經功能缺損，調節血清NO、IGF-l和MIF水平。
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